Untuk mengurangkan pengikatan antibodi tidak spesifik dan, akibatnya, mengurangkan isyarat latar belakang, adalah disyorkan untuk menggunakan penyelesaian penyekat sebelum pengeraman dengan antibodi Penyelesaian penyekat yang paling berkesan akan adalah yang mengandungi serum daripada spesies yang sama di mana antibodi sekunder dinaikkan.
Bagaimanakah anda menghalang kesan latar belakang?
Mengurangkan ketebalan bahagian tisu boleh membantu mengurangkan pewarnaan latar belakang. Cuba potong bahagian yang lebih nipis untuk IHC yang lebih bersih. Anda juga perlu berhati-hati agar tidak membiarkan bahagian kering kerana pengeringan boleh mengakibatkan pewarnaan tidak spesifik yang tinggi.
Bagaimanakah anda mengoptimumkan imunofluoresensi?
Mikoskopi Imunofluoresensi: 10 Petua Teknikal untuk Kejayaan
- Penetapan dan Permeabilisasi sel. …
- Kekhususan Antibodi. …
- Menggunakan pencairan antibodi yang sesuai. …
- Mengoptimumkan Penampan dan Ejen Penyekat. …
- Menggunakan Ketumpatan Sel yang Sesuai. …
- Pewarnaan Berbilang. …
- Antibodi Sekunder. …
- Mengurangkan Latar Belakang.
Apakah yang menyebabkan pewarnaan latar belakang?
Pewarnaan latar belakang boleh disebabkan oleh pengikatan antibodi yang tidak sesuai atau secara kesilapan semasa penyediaan slaid tisu.
Adakah antibodi sekunder mengurangkan isyarat latar belakang?
F(ab) antibodi sekunder khusus boleh membantu mengurangkan isyarat latar belakang dengan menghapuskan pengikatan tidak spesifik protein IgG yang terdapat dalam tisu oleh antibodi sekunder.
