Logo ms.boatexistence.com

Mengapa sel kompeten mesti disimpan di atas ais?

Isi kandungan:

Mengapa sel kompeten mesti disimpan di atas ais?
Mengapa sel kompeten mesti disimpan di atas ais?

Video: Mengapa sel kompeten mesti disimpan di atas ais?

Video: Mengapa sel kompeten mesti disimpan di atas ais?
Video: BIOLOGI Kelas 11 - Struktur dan Organel Sel | GIA Academy 2024, Mungkin
Anonim

Pastikan mereka SEJUK! Proses membuat sel kompeten adalah mencabar kerana keperluan untuk sel kekal sejuk. Ini penting kerana sel adalah sangat sensitif dan rapuh semasa ia dibuat kompeten Mengekalkan suhu rendah membantu mengelakkan kematian sel semasa pemprosesan.

Mengapakah tindak balas disimpan di atas ais semasa percubaan transformasi?

Campuran sel plasmid kemudiannya dipanaskan sebentar hingga 45–50°C, membenarkan DNA memasuki sel melalui membran yang terganggu. Campuran yang dipanaskan kemudian diletakkan semula di atas ais untuk mengekalkan plasmid di dalam bakteria … Jika larutan DNA plasmid mengandungi terlalu banyak garam di dalamnya, arka boleh berlaku, menjejaskan transformasi.

Mengapa anda meletakkan tiub di atas ais?

Mengapa anda fikir kami meletakkan tiub di atas ais? Untuk memasukkan DNA ke dalam bakteria, kita perlu membuat lubang padanya dengan bahan kimia kalsium klorida (CaCl2). … Lubang yang dicucuk untuk membolehkan DNA masuk meninggalkan bakteria bocor. Jika kita tidak menyimpannya di atas ais, mereka akan 'berdarah' hingga mati.

Apakah peranan kalsium klorida ais sejuk dalam penyediaan sel yang kompeten?

Proses transformasi kejutan haba kalsium klorida menggalakkan sel bakteria untuk mengambil DNA daripada persekitaran sekeliling. … Larutan CaCl2 yang sejuk memudahkan pengikatan DNA pada permukaan sel, yang kemudiannya memasuki sel selepas kejutan haba yang singkat (3).

Bagaimanakah anda menyimpan sel yang cekap?

Sel kompeten hendaklah disimpan pada - 80°C. Penyimpanan pada -20°C akan mengakibatkan penurunan ketara dalam kecekapan transformasi (TE). Apabila diuji pada NEB 5-alpha Competent E. coli (NEB C2987H), sel kehilangan 94.5% TE selepas hanya 24 jam penyimpanan pada -20°C.

Disyorkan: