Garis panduan untuk mencairkan sel
- Cairkan sel beku dengan cepat (< 1 minit) dalam tab mandi air 37°C.
- Cairkan sel yang telah dicairkan perlahan-lahan sebelum anda mengeramkannya, menggunakan medium pertumbuhan yang telah dipanaskan sebelumnya.
- Sel dicairkan plat pada ketumpatan tinggi untuk mengoptimumkan pemulihan.
- Sentiasa gunakan teknik aseptik yang betul dan kerja dalam tudung aliran laminar.
Mengapakah pencairan sel dilakukan?
Adalah penting untuk mencairkan sel dengan betul untuk mengekalkan daya maju kultur dan membolehkan kultur pulih dengan lebih cepat. Sesetengah cryoprotectants, seperti DMSO, adalah toksik melebihi 4 °C. Oleh itu, adalah penting bahawa kultur dicairkan dengan cepat dan dicairkan dalam medium kultur untuk meminimumkan kesan toksik.
Apakah proses pencairan?
Pencairan ialah proses mengambil produk sejuk beku daripada beku kepada suhu (biasanya melebihi 0°C) di mana tiada baki ais, iaitu “penyahbekuan”. Pencairan selalunya dianggap sebagai pembalikan proses pembekuan.
Apakah cara terbaik untuk membekukan sel?
Bekukan sel perlahan-lahan dengan mengurangkan suhu pada kira-kira 1°C seminit menggunakan pembeku krio kadar terkawal atau bekas pembekuan krio seperti “Mr. Frosty,” tersedia daripada Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Sentiasa gunakan medium pembekuan yang disyorkan.
Bagaimanakah anda mencairkan sel primer?
Lap bahagian luar botol sel dengan 70% etanol atau isopropanol. Dalam kabinet biokeselamatan, putar penutup suku pusingan untuk melegakan tekanan dalaman dan kemudian ketatkan semula. Cairkan sel dengan cepat dalam tab mandi air bersuhu 37°C dengan memutarkan vial perlahan-lahan. Keluarkan botol apabila sedikit ais tinggal.
